- میکروب نوری معمولی
- لام نئوبار
- ترازوی حساس
- هود بیولوژیک
- دستگاه الایزا Reader
- دستگاه pH متر
- ورتکس
- تانک های ازت مایع
- بن ماری
- فور
- اتوکلاو
- فریزرهای ۲۰- و ۷۰- درجه سانتی گراد
- انکوباتور CO2 و معمولی
- سمپلر های متغیر و ثابت و راکهای مخصوص سر سمپلر
- سانتریفوژ معمولی و یخچال دار
- لوله های آزمایش در پیچ دار و معمولی
- پیپت مدرج و پیپت پاستور
- ظروف شیشه ای از جمله: ارلن، بشر، استوانه ی مدرج و …
- میکروتیوب ۵/۰، ۵/۱، ۲ میلی لیتر
- سرنگ ml50 و ml20
- ظروف مخصوص کشت سلول در اندازه های مختلف شامل فلاسک ها و میکروپلیت
- فیلتر ۲۲/۰ میکرون
- انواع لوازم شیشه ای مخصوص نگهداری محیط، سرم و تریپسین
- شیکر
- همزن مغناطیسی
۳-۲ مواد مورد نیاز برای کشت سلول:
- رده سلولی Hela
- سرم جنین گاو (FBS) Fetal Bovine Serum
- محیط کشت (DMEM) Dulbecco,s Modified Essential Medium
- آنتی بیوتیک های استرپتومایسین و پنی سیلین
- محلول تریپسین- ورسن ( Trypsin-Versen)
- بی کربنات سدیم
- آب مقطر دیونیزه
- دی متیل سولفوکساید (DMSO)
- محلول PBS بدون کلسیم و منیزیم Calcium Magnesium Free- Phosphate Baffered Saline
۳-۳ آماده کردن محیط های کشت سلول:
برای انجام کشت سلول در خارج از بدن موجود زنده باید شرایطی را فراهم آورد که به خصوصیات داخلی
بدن موجود زنده بسیار تشابه داشته باشد. برای فراهم نمودن این شرایط از محیط های کشت سلول استفاده می شود که تامین کننده مواد غذایی مورد نیاز سلول از جمله اسید های آمینه، نمک ها، فسفات ها، مواد قندی و بنا به ضرورت مواد رنگی خنثی به عنوان معرف. در این پژوهش از محیط های DMEM شرکت Biosera استفاده گردید.
۳-۴ تهیه محیط کشت:
مهم ترین مواد لازم جهت تهیه یک لیتر محیط کشت سلولDMEM عبارتند از:
پودر محیط کشت DMEM ۴/۱۳ گرم
آنتی بیوتیک پنی سیلین unit/ml100
آنتی بیوتیک استرپتومایسین µg/ml ۱۰۰
ال گلوتامین ۳/۰ گرم
بی کربنات سدیم ۷/۳ گرم
آب دیونیزه تا حجم یک لیتر
پس از تهیه محیط کشت باید pH محیط را به میزان مطلوب (۷- ۸/۶) تنظیم نمود که برای این منظور از NaOH یک مولار و اسید کلریدریک یک مولار استفاده می شود. از آنجایی که محیط کشت سلول منبع غنی از مواد مغذی و مستعد برای رشد باکتریها می باشد، استفاده از آنتی بیوتیک های وسیع الطیف نظیر استرپتومایسین و پنی سیلین الزامی می باشد.
۳-۵ استریلیزاسیون محیط کشت سلول:
