چکیده
به منظور شناسایی لاین های پرمحصول گندم با خصوصیات مطلوب زراعی، 40 لاین خالص نوترکیب )نسل شش( گندم نان حاصل از تلاقی ارقام ‘نوراستار’ )پاییزه( و ‘زاگرس’ )بهاره( در قالب طرح بلوک های کامل تصادفی با سه تکرار، در مزرعهه تحقیقهاتی دانشهکده کشاورزی دانشگاه تبریز و در سال زراعی 1392 ارزیابی شدند. صفات مورد اندازه گیری شهامل وزن پهدانکل ، وزن میهانگره دوم، وزن سنبله، تعداد دانه در سنبله، تعداد سنبله در کرت، زیست توده کل، عملکرد دانه، وزن هزاردانه، ارتفاع بوته، طول پدانکل، طول میهانگره دوم، طول سنبله، شاخص برداشت، سطح برگ پرچم و عملکرد کاه بودند. بین لاین های مورد مطالعه از نظر همه صهفات بهه جهز وزن سنبله، سطح برگ پرچم و شاخص برداشت اختلاف معنی دار مشاهده شد. تعداد دانه در سنبله، تعداد سنبله در کهرت ، زیسهت تهوده و عملکرد کاه از صفات مهمی بودند که تنوع ژنتیکی بالایی نسبت به سایر صفات داشتند. صفات وزن پدانکل، وزن میهانگره دوم، تعهداد دانه در سنبله، تعداد سنبله در کرت و وزن هزاردانه از وراثتپذیری بالایی برخوردار بودند. وزن پدانکل، وزن میانگره دوم و تعداد دانه در سنبله بیشترین درصد بازده ژنتیکی را داشتند. در مقایسه میانگین صفات در مقایسه میانگین صفات، لاین های 93، 28، 296 و 31 به عنوان برترین لاین ها شناسایی شدند. براساس تجزیه همبستگی ساده، رگرسیون گام به گام و تجزیه علیت، صفات تعداد دانه در سنبله، تعداد سنبله در کرت مهمترین اجزای مؤثر بر افزایش عملکرد دانه بودند. تجزیه خوشهه ای از نظهر کلیهه صهفات و براسهاس میهانگین داده های استاندارد و روش Ward لاین های مورد مطالعه را به چهار گروه تقسیمبندی کرد. با انجام تجزیه به عامل ها، چهار عامل مهم، در حدود 82 درصد از کل تغییرات داده ها را توجیه کردند.
کلید واژه ها: بازده ژنتیکی، تجزیه علیت، عملکرد دانه، وراثتپذیری.
Email: norouzi@tabrizu.ac.ir نویسنده مسئول *
مقدمه
گندم )با نام علمهی Triticum aestivum L.( در سها لهها یاخیر بهدلیل افزایش رشد جمعیهت و بهروز بحهران غهذایی برای اکثر کشورها بهویژه کشورهای در حال توسعه و فقیهر و مزای ای مختلف ی ک ه در مقایس ه ب ا س ایر محص ولات کشاورزی دارد، این گیاه را تبدیل به ابزار سیاسی اقتصهادی کرده است. پهیش بینهی شهده اسهت تها سهال 2020 میهزان تقاضای گندم 40 درصد افزایش پیدا کند، لذا افزایش سریع تولی د گن دم ض روری اس ت [11]. در ای ن راس تا، عل وم مختلف جهت دسهتیابی بهه ایهن ههدف بهه کمه بخهش کشاورزی آمدند که بی تردیهد یکهی از کلیهدی تهرین آنهان ، اصلاح نباتات است [8]. تنوع ژنتیکی اساس اصلاح نباتات و ماده خام و ضروری برای آن می باشد [21]. با بهالا رفهتن تنوع ژنتیکی در ی جامعه، دامنه انتخاب، خهواه طبیعهی و خواه مصنوعی وسیع تر خواهد شد [4].
گن دم از نظ ر خصوص یات مختل ف کم ی و کیف ی و سازگاری با عوامل محیطی و انواع مقاومت هها دارای تنهوع ژنتیکی وسیعی می باشد. مطالعهه تنهوع ژنتیکهی و تفکیه ژنوتیپ ها از طریق بررسی درجه شباهت و تفاوت تعدادی از نمونه امکانپذیر می گردد و شرط انجام آن، گهروه بنهدی نمونه ها با بهره گرفتن از معیار تشابه یا عهدم تشهابه و نیهز بهه -کارگیری انواع مختلف روش های آمهاری چنهدمتغیره اسهت .
تجزیه خوشه ای یکی از روش های مناسب برای گروهبنهدی ژنوتیپ ها است. علاوه بر استفاده از تنوع ژنتیکی توده ههای بومی و گونه های وحشی، پژوهشگران علاقمنهد بهه ایجهاد تغییرات در داخل ارقام اصلاح شده نیز مهی باشهند . بهدین -منظور، لاین های مختلف با ویژگهی ههای مکمهل را بها ههم تلاقی داده و در بین نتاج حاصل نسهبت بهه بررسهی تنه وع ژنتیکی اقدام می شود. جمعیت های مصهنوعی کهه بیشهترین کههاربرد مطالعههاتی را در تنههوع دارنههد، اغلههب دو والههد هموزیگوسی با هم تلاقی داده می شوند و جمعیت در حال تفرق 2F )نظیهر جمعیهت لایهن ههای هاپلوئیهد مضهاعف ،جمعیت لاین های خالص نوترکیهب و جمعیهت لایهن ههای
ایزوژن( تهیهه مهی شهود ، یکهی از انهواع ایهن جمعیهت هها ، جمعیت لاین های خالص نوترکیب[1] )RIL( اسهت . RILهها لاین های خالصی هستند که بهه روش باله ته بهذری از جمعیت 2F با خودباروری های مکرر تولید میشهوند یعنهی مشتق شده از جمعیت 2F است که هیچ گزینشهی تها نسهل هفت یا هشت صورت نمی گیرد و هدف این است که تمام ترکیب های مختلف آللی در نتهاج وجهود داشهته باشهد . در هنگام تولید، RIL های مورد مطالعه این آزمایش نیهز ههیچ –گونههه گههزینش مصه نوعی صههورت نگرفتههه و تمه امی نوترکیبی های دو والد تا خالص شدن نتهاج حفه گردیهده است [7].
هدف از انجام پژوهش حاضهر ، بررسهی تنهوع ژنتیکهی بین نسل ها از نظر صفات مورفولوژیکی و زراعی، شناسایی لاین ههای برتهر از لحها عملکهرد و سهایر صهفات مهورد ارزیابی و نیز گروهبندی لاین ها از نظر صفات مورد مطالعه بود.
مواد و روش ها
آزمایش در ایستگاه تحقیقهاتی دانشهکده کشهاورزی تبریهز واقع در اراضی کرکج در 12 کیلومتری شرق تبریز با ارتفاع 1360 متر از سطح دریا، طی سال زراعهی 91-1390 اجهرا شد. آب و هوای منطقه از نوع نیمه خش سرد کوهستانی می باشد. خاک سطحی ایسهتگاه جهزو خهاک ههای لهومی – ش نی ب وده و دارای اس یدیته قلی ایی ض عیف ت ا متوس می باشد [1].
مواد گیهاهی مهورد اسهتفاده در ایهن مطالعه ه، 38 لایهن خالص )نسل 6( نوترکیب گندم نان حاصل از تلاقی ارقهام ‘نوراستار’ و ‘زاگرس’ به همهراه والهدین بهود )جهدول 1(.
رقم ‘نوراستار’ در دهه 80 در ساسهکاچوان کانهادا معرفهی شد که مقاوم ترین رقم به سرما در دنیا محسهوب مهی شهود [14]. از این رقم به عنوان ژنوتیپ استاندارد مقاوم به سرما و انجماد در اکثر تحقیقات استفاده می شود. ‘نوراسهتار ’ بهه بهاره سازی طولانی نیاز دارد و مدت بهاره سازی آن بین 21 تا 49 روز است [13]. حهداقل پهنج هفتهه بههاره سهازی در دمای دو درجه سهانتی گهراد بهرای شهروع نمهو زایشهی آن ضروری است. این رقم جزء ارقام پابلند بهوده و ارتفهاع آن بین 110 تا 130 سانتی متر است [12]. رقم ‘زاگهرس ’ یه رقم بهاره است. این رقم با شجره Tan “S”/Vee”// Opata از م واد گی اهی دری افتی از مؤسس ه ب ینالملل ی ایک اردا )انستیتو تحقیقات کشاورزی مناطق خش( انتخهاب شهده است. رقم ‘زاگرس’ به خشکی و گرمهای آخهر دوره رشهد متحمل اسهت و همچنهین دارای سهازگاری وسهیع و قابهل مقایسه با ارقامی نظیر مارون بهه لحها برتهری عملکهرد و مقاومت بیشتر به بیماری زنه زرد و قههوه ای اسهت . ایهن رقم جزو زودرس ترین ارقام به شمار می رود و برگ پهرچم آن پس از هفت هفته ظاهر می شود. ‘زاگرس’ به عنوان ی
جدول 1. نام لاین های خالص نوترکیب گندم حاصل از تلاقی ارقام ‘زاگرس’ و ‘نوراستار’
شماره لاین
ردیف
شماره لاین
ردیف
شماره لاین
ردیف
شماره لاین
ردیف
RIL-206
31
RIL-95
21
RIL-45
11
زاگرس )1(
1
RIL-225
32
RIL-102
22
RIL-46
12
نورستار )2(
2
RIL-239
33
RIL-143
23
RIL-51
13
RIL-8
3
RIL-265
34
RIL-145
24
RIL-58
14
RIL-15
4
RIL-281
35
RIL-159
25
RIL-62
15
RIL-23
5
RIL-293
36
RIL-163
26
RIL-63
16
RIL-26
6
RIL-296
37
RIL-182
27
RIL-68
17
RIL-27
7
RIL-298
38
RIL-183
28
RIL-86
18
RIL-28
8
RIL-300
39
RIL-184
29
RIL-93
19
RIL-31
9
RIL-328
40
RIL-195
30
RIL-94
20
RIL-32
10
رقم حساس است و دمای کشنده 50 درصد آن منهای سهه درج ه س انتیگ راد اس ت. ارتف اع ‘زاگ رس’ 80 ت ا 90
سانتی متر و نیمهه پاکوتهاه اسهت . ‘زاگهرس ’ از نظهر جمیهع صفات، ی رقم قابل توصیه برای مناطق دیهم اسهت . ایهن رقم از لحا مقاومت به سرما و نیز از نظر صفات زراعی با
‘نوراستار’ تفاوت قابل توجهی دارد [2].
کاشت بذور پس از انجام شخم و عملیهات دیسه در زمینی به سهطح 350 مترمربهع انجهام گرفهت . در پهژوهش حاضر، برای ارزیابی لاین های خهالص نوترکیهب گنهدم از طرح بلوک های کامل تصادفی با سه تکرار استفاده شد. ههر تکرار شامل چهار کرت بود که در هر ی از آنهه ا 10 بهذر خالص لاین گندم با توزیع تصادفی کشت شدند. هر واحد آزمایش، نیز متشکل از سه ردیهف بهه طهول دو متهر و بهه فاصله 20 سانتی متر بود. فاصله بوته ها در روی ردیف دو و عمق کاشت بذور 5/1 سانتی متر و فاصهله بهین ههر واحهد آزمایش 5/0 متر درنظر گرفته شهد . کهود اوره )46 درصه د نیتروژن( به میزان 4/217 کیلوگرم در هکتهار )معهادل 100 کیلوگرم نیتروژن خالص در هکتار( و در سه مرحله )هنگام کاشت، ساقه دهی و گلدهی( در خاک مصرف شد.
در مراحل مختلف رشد و نمو گیهاه ، برخهی از صهفات
زراعی مورفولوژی مهورد انهدازه گیهری قهرار گرفتنهد کهه عبارتند از:
ارتفاع بوته: در اوایل مرحله خمیری شدن دانهه هها ، در هر واحد آزمایشی ارتفاع 10 بوته تصادفی، از سطح خهاک )محل طوقه( تا انتهای سنبله اصلی )بهدون درنظهر گهرفتن ریش ها(، برحسب سانتی متهر و بها دقهت یه میلهی متهر اندازه گیری شد.
سطح برگ پرچم: برای تعیین سهطح بهرگ پهرچم 10 بوته به صورت تصادفی انتخاب و طول و بزرگترین عرض برگ پرچم مربوط به سنبله اصلی برحسب سانتی متهر و بها دقت ی میلی متر اندازه گیری شد. سهطح بهرگ پهرچم بها استفاده از رابطه محاسبه شد:
A = 0/7 )W × L( )1(
در این رابطه، A سطح برگ پرچم، L و W به ترتیهب طول و عرض پهن برگ می باشد [20].
طول سنبله: از قاعده سنبله تها نهوک آن بهدون درنظهر گرفتن ریش ها برحسب سانتی متر و با دقت ی میلی متهر اندازهگیری شد.
طول پدانکل: فاصله اولین گهره پهای سهنبله تها محهل اتصال برگ پرچم به ساقه اصلی برحسب سانتی متر انهدازه گرفته شد.
وزن پدانکل: وزن پدانکل در 10 بوته تصهادفی از ههر لاین در هر تکرار اندازه گیری شد و میهانگین وزن پهدانکل
10 بوته به عنوان وزن پدانکل درنظر گرفته شد.
وزن میانگره دوم: وزن میهانگره دوم نیهز هماننهد وزن پدانکل، برحسب گرم با ترازوی حساس تعیین شد.
وزن سنبله: میانگین وزن سنبله ههای 10 بوتهه انتخهاب شده در هر تکرار به عنوان وزن سنبله درنظر گرفته شد. تعداد دانه در سنبله: از بین سنبله های بارور، 10 سنبلهاصلی به طور تصادفی انتخاب و تعهداد دانهه ههای موجهود شمارش و تعداد بهدست آمده به 10 تقسیم شد.
تعداد سنبله در کرت: تمامی سنبله های اصلی و فرعی موجود در هر کرت شمارش شدند.
وزن هزاردانه: برای اندازه گیری وزن هزاردانه هر لاین،
1000 دانه سالم شمارش و وزن آنها برحسب گهرم تعیهین گردید.
عملکرد دانه: میزان عملکرد کل دانه بهدسهت آمهده از سه ردیف هر کرت، برحسب گرم بها تهرازوی حسهاس تها
01/0 گرم توزین شد.
زیست توده: وزن کل بخش هوایی )بخش رویشهی بهه اضافه دانه( هر واحد آزمایشهی پهس از حهذف حاشهیه هها برحسب گرم و با ترازوی حساس تا 1/0 گرم توزین شد.
عملکرد کاه: از طریق تفاضهل عملکهرد دانهه کهرت از وزن زیست توده کل کرت محاسبه شد.
شاخص برداشتت : از نسهبت عملکهرد دانهه کهرت یها عملکرد اقتصادی به وزن زیست توده کل بهدست آمد.
واریانس ژنوتیپی که بخشی از واریانس فنهوتیپی اسهت باتوجه به امید ریاضی ها از فرمول )2( محاسبه شد:
)2( σˆ2g MST r MSE. در ای ن رابط ه، ˆ2g واری انس حقیق ی ژنتیک ی، ˆ 2e واریانس محیطی و r تعداد تکرار مؤثر بود.
برای پیشبینی میهزان پیشهرفت در عملیهات اصهلاحی اقدام به محاسبه بازده ژنتیکی با شدت 10 درصد براسهاس فرمول زیر محاسبه میشود:
k c σˆ2g
σˆ2e σˆ2g Gc = )3(
r
در این رابطه، Gc بازده ژنتیکی، C ضهریب کنتهرل و K ضریب شدت گزینش )75/1( بود و درصد بهازده ژنتیکهی نیز از حاصل تقسیم بازده ژنتیکی بهر میهانگین کهل صهفت مربوطه بهدست میآید.
برای برآورد وراثتپذیری از فرمول زیهر اسهتفاده شهد .
خطای استاندارد )SE( وراثتپذیری بها اسهتفاده از فرمهول واریانس نسبت کمپتورن محاسبه شد [15]:
hb2 ˆg2 / ˆg2 ˆe2r )3(
)4(
SEhb2 خط ای اس تاندارد )SE( وراث تپ ذیری ب ا اس تفاده از فرمول واریانس نسبت کمپتورن محاسبه شد [15]. در ایهن رابطه، ˆ2g واریانس حقیقی ژنتیکی، ˆ2e واریهانس محیطهی و r تعداد تکرار مؤثر بود.
برآورد ضریب تغییهرات ژنتیکهی )cvg( صهفات مهورد ارزیابی نیز از طریق فرمول )5( صورت گرفت:
CV g Xδˆ2g 100 )5(
در این رابطه، X میانگین کل صهفت مهورد ارزیهابی بود.
پس از جمعآوری داده ها، مفروضات تجزیهه واریهانس شامل نرمال بودن خطاهای آزمایشی، یکنواختی واریانس ها و غیرافزایشی بودن اثر تیمار و تکرار و همچنین مفروضات تجزیه رگرسیون بررسی شد که تمهامی مفروضهات برقهرار بودند. به منظور تثبیت خطای نهوع اول در سهطح احتمهال موردنظر، ابتدا تجزیه واریهانس چنهدمتغیره [2] )MANOVA( انجام گرفت. سپس برای کلیه صهفات مهورد انهدازه گیهری ، تجزیه واریانس ت متغیره در قالب طرح بلوک ههای کامهل تصادفی انجام پذیرفت و مقایسه میانگین صفات با اسهتفاده از آزمون دانکن انجام شهد )نتهایج گهزارش نشهده اسهت( .
رواب بین صهفات براسهاس ضهرایب همبسهتگی خطهی و صفات تأثیرگهذار بهر عملکهرد دانهه بها اسهتفاده از تجزیهه رگرسیون چندگانه به روش گهام بهه گهام و تجزیهه علیهت تعیین شد. به منظور کاهش تعداد متغیرها به عوامهل اصهلی و تفسیر بهتر نتایج از تجزیه به عامل ها براساس تجزیهه بهه مؤلفه های اصلی و با چرخش وریماکس استفاده شد. بهرای گروه بندی ژنوتیپ های مورد مطالعه، تجزیهه خوشهه ای بهه روش WARD و مقیاس فاصله اقلیدسهی صهورت گرفهت .
ب رای تعی ین بهت رین مح ل ب رش دن دروگرم در تجزی ه خوش ه ای، تجزی ه ت ابع تش خیص کانونی ب ه ص ورت استاندارد کردن داده ها و مقیاس ماهالانوبیس به کهار رفهت [5]. محاسههبات آمههاری بهها اسههتفاده از نههرمافزارهههای
.[6] انجام شد EXCEL و SAS ،SPSS ،MSTATC
نتایج و بحث
آگاهی از میزان وراثتپهذیری صهفات ، یکهی از اطلاعهات اساسی در تعیین میزان موفقیت گزینش محسوب می شهود .
بهطورکلی، یکی از راهکارهای مههم تعیهین روش مناسهب برای اصلاح جمعیت به میزان وراثت پذیری صهفات مهورد اصلاح، بستگی دارد. باتوجه به اینکه واریانس ژنتیکی بهین لاین های اینبرد نوترکیهب بهرآوردی از دو برابهر واریهانس افزایشی جمعیت اولیه است [12]، بنابراین تمهام واریهانس ژنتیکی موجهود در بهین لایهن ههای مهورد مطالعهه از نهوع افزایشی و وراثتپهذیری بهرآورد شهده از نهوع خصوصهی است. میزان وراثتپذیری صهفات انهداز ه گیهری شهده وزن پدانکل، وزن میانگره دوم، تعداد دانه در سنبله، تعداد سنبله در کرت و وزن هزار دانه از وراثتپذیری خصوصی بهالای 6/0 برخوردار بودند )جدول 2(. بهالاترین میهزان وراثهت -پذیری را برای صفات تعهداد روز تها ظههور سهنبله ، طهول سنبله و تعداد دانه در سنبله )بهترتیب 97/0، 94/0 و 94/0(به دست آمد [3]. وراثتپذیری خصوصی بهالا بهرای طهول سنبله و نیز وراثتپذیری بالا برای وزن هزاردانهه مشهاهده شد . وزن پدانکل با 35/20 درصد بیشترین بهازده ژنتیکی را داشت )جدول 2(. این صهفت بهالاترین ضهریب تغییرات ژنتیکی )51/20 درصد( را نیز به خهود اختصها داد و همچنین وراثتپذیری خصوصی بالایی داشت. تعداددانه در سنبله و وزن میهانگره دوم بهه ترتیهب بها 60/19 و77/17 درصد، بیشترین بازده ژنتیکی را بعد از وزن پدانکل به خود اختصا دادند. کمترین میزان بازده ژنتیکی مربوط به تعداد سنبله در کرت بود.
جدول 2. مقادیر واریانس ژنتیکی و فنوتیپی، وراثتپذیری و بازده ژنتیکی صفات مورد بررسی
منابع تغییرات وزن پدانکل میانوزن گره دوم وزن سنبله در تعداد سنبلهدانه در تعداد کرتسنبله کل زیست توده سطح برگ
پرچم
2/48 6727/21 56/02** 0/15 0/005 0/008
واریانس ژنتیکی 4–10 × 16 001/0 013/0 14/0
5/36
11/32
11/63
16/01
8/5
17/43
20/51
ضریب تغییرات ژنتیکی )%(
0/82
17294/29
2242/39
18/67
0/049
16 × 10-4
26 × 10-4
واریانس فنوتیپی
0/09
0/23
0/35
0/38
0/13
0/31
0/30
وراثتپذیری خصوصی
0/22
0/15
0/07
0/06
0/2
0/11
0/10
خطای استاندارد وراثتپذیری
0/27
106/03
0/62
5/82
0/10
0/04
0/05
بازده ژنتیکی
3/88
13/31
0/18
19/60
6/10
17/77
20/35
درصد بازده ژنتیکی
ادامه جدول 2
منابع تغییرات عملکرد دانه وزن هزاردانه ارتفاع بوته طول پدانکل میانگرهطول دوم طول سنبله شاخص برداشت عملکرد کاه
4519/05
6/6 × 10-4
0/42
0/97
7/19
24/4
3/30
788/63
واریانس ژنتیکی
13/4
7/26
9/10
6/17
8/24
7/54
5/40
9/79
ضریب تغییرات ژنتیکی )%(
12652/74
39 × 10-4
1/01
1/72
13/49
42/84
4/87
1993/86
واریانس فنوتیپی
0/18
0/08
0/20
0/28
0/26
0/28
0/34
0/20
وراثتپذیری خصوصی
0/17
0/24
0/16
0/12
0/13
0/12
0/09
0/16
خطای استاندارد وراثتپذیری
70/3
0/02
0/73
1/29
3/42
6/52
2/59
30/9
بازده ژنتیکی
14/69
4/85
8/82
7/61
10/52
9/14
8/24
9/70
درصد بازده ژنتیکی
*62/5981 **60/14 **55/128 **47/40 **171/5 *03/3 [3] 012/0 **253/37958
همبستگی عملکرد دانه با زیسهت تهوده ، تعهداد سهنبله ، تعداد دانه در سنبله، وزن پدانکل، وزن سنبله، وزن میهانگره دوم، ارتفاع بوته، طول میانگره دوم و طول سنبله در سهطح احتم ال ی درص د مثب ت و معن ی دار ب ود )ج دول 3(.
همبستگی سهایر صهفات مهورد ارزیهابی بها عملکهرد دانهه غیرمعنی دار بود، لذا از بین اجزای اصهلی عملکهرد دانهه در گندم )تعداد سنبله در مترمربع، تعداد دانه در سهنبله و وزن هزاردان ه( تنه ا وزن هزاردان ه همبس تگی معن ی داری ب ا عملکرد دانه نداشت )149/0 = r(.
زیست توده و عملکرد کاه بالاترین همبسهتگی )954/0