عنوان
ارزیابی اثرات متقابل دارویی و فعالیت ضد باکتریایی عصاره متانولی خارخسک روی ایزولههای بالینی Escherichia coli
استاد راهنما
استاد مشاور
نگارش
زمستان1394
تکه هایی از متن به عنوان نمونه :
چکیده (فارسی)
خارخسک (Tribulus terrestris) به طور سنتی در درمان عفونت دستگاه ادراری استفاده میشود. باکتری Escherichia coli به عنوان مهمترین عامل عفونت ادراری میتواند به عصاره خارخسک حساس باشد. هدف از این مطالعه ارزیابی فعالیت ضدباکتریایی عصاره متانولی خارخسک در مقابل ایزولههای بالینی اشریشیاکلی جدا شده از عفونت ادراری است. ساپونینها به عنوان مهمترین جزء عصاره متانولی خارخسک تعیین شد. فعالیتهای ضدباکتریایی عصاره متانولی خارخسک با بهره گرفتن از روش رقت سازی در براث تعیین شد. اثرات سینرژیسمی عصاره متانولی خارخسک با جنتامایسین با بهره گرفتن از تکنیک براث دایلوشن تعیین گردید و میزانFICI(Fractional Inhibitory Concentration Index) تعیین شد. منحنی ایزوبلوگرام نیز تعیین شد.
محتوای ساپونینی عصاره متانولی خارخسک 45% وزن گیاه خارخسک تعیین شد. میزان MIC و MBC برای ایزولههای بالینی E. coli (n=51) به ترتیب μg/ml 27/0± 5/3 و 5/0±4/7 و برای 3/1±9/3 و 8/1±4/6 به دست آمد. عصاره متانولی خارخسک و جنتامایسین با FICI معادل با 1375/0 اثر سینرژیسمی نشان داد. بنابراین، خارخسک میتواند به عنوان درمان جایگزین در درمان عفونت ادراری قابل استفاده است.
واژگان کلیدی:اثرات متقابل دارویی، فعالیت ضدباکتریایی،خارخسک،اشریشیاکلی
فهرست مطالب
عنوان صفحه
فصل اول. 1
مقدمه و کلیات. 1
1-1 مقدمه. 2
1-2 اهداف تحقیق 3
1-3 بیان مسئله. 4
1-4 فرضیه ها 7
1- 5 باکتری اشریشیاکلی (Escherichia coli) 8
1-1-5 خصوصیات مورفولوژی 8
2-1-5 خصوصیات کشت و بیوشیمیایی 9
1-2-1-5 خصوصیات کشت. 9
2-2-1-5 خصوصیات بیوشیمیایی 10
1-6 ساختار آنتی ژنی اشریشیاکلی 10
1-1-6 آنتی ژن سوماتیک یا آنتی ژن O 11
2-1-6 آنتی ژنهای کپسولی یا آنتی ژن K 11
3-1-6 آنتی ژنهای تاژکی یا آنتی ژن H 11
1-7 بیماری زایی اشریشیاکلی 12
1-1-7 عفونت دستگاه ادراری 12
2-1-7 فاکتور چسبندگی Adhesins. 12
3-1-7 اگزوتوکسینها 13
4-1-7 انترو توکسین ها 13
5-1-7 وروتوکسینها 14
6-1-7 همولیزینها 14
7-1-7 باکتریوسین 14
8-1-7 سیدروفورها 15
1-8 عفونتهای اشریشیاکلی 15
1-1-8 سپتی سمی 15
2-1-8 گاستروانتریت. 16
1-2-1-8 اشریشیاکلی انترو توکسیژنیک (ETEC) 16
2-2-1-8 اشریشیاکلی انتروپاتوژنیک (EPEC) 17
5-2-1-8 اشریشیاکلی انترواگرگتیو(EAEC) 18
1-9 عفونتهای اشریشیاکلی خارج رودهای 18
1-1-9 مننژیت نوزادی 19
2-1-9 سپسیس 19
3-1-9 التهاب مثانه. 19
4-1-9 عفونتهای مجاری ادراری (UTI) 19
1-10 مقاومتهای میکروبی 21
1-11 موارد استفاده از گیاهان دارویی 22
1-12کشت گیاهان دارویی 22
1-13گیاهان دارویی و نقش آنها در درمان بیماریها 26
1-14 گیاهان دارویی و اثرات ضدمیکروبی آنها 27
1-15 خارخسک 28
1-16خواص خارخسک از دیدگاه طب سنتی 30
1-17 خواص خارخسک در تحقیقات جدید. 30
1-1-17 نقش گیاه خارخسک در ناباروری و افزایش میل جنسی 32
2-1-17 نقش گیاه خارخسک در نیروزایی 32
3-1-17 نقش گیاه خارخسک در درمان سنگهای کلیوی 33
1-18ترکیبات موثره استخراج شده از گیاه خارخسک 33
1-19 ترکیبات ضد میکروب شناسایی شده در گیاه خارخسک 33
1-1-19ساپونینها 34
2-1-19فلاوونوئیدها 34
3-1-19 آلکالوئیدها 35
1-20 عوارض جانبی گیاه خارخسک 35
1-21 تداخلات دارویی و غذایی 35
1-22 مصرف در بارداری و شیردهی 36
1-23 منع و احتیاطات مصرف. 36
1-24 اشکال دارویی رسمی موجود در ایران. 37
فصل دوم. 37
بررسی منابع 37
2-1 پیشینه پژوهش و هدف از مطالعه. 38
فصل سوم. 40
مواد و روش ها 40
3-1مواد و تجهیزات مورد استفاده 42
3-2روش اجرای آزمون. 44
1-3-2 عصاره گیاه و آنالیزهای شیمیایی 44
1-1-3-2 عصاره خارخسک (Tribulus terrestris) 44
3- 3روش شناسایی و تعیین مقدار ماده شاخص هر یک از اجزاء. 44
1-3-3 تعیین مقدار ساپونین تام در عصاره خارخسک: 44
3-4 آنالیزهای میکروبی 46
1-3-4سویههای بالینی E. coli 46
1-2-3-4 طرز تهیه محیط کشت EMB 46
3-5 تهیه سوسپانسیون میکروبی معادل استاندارد نیم مک فارلند. 47
1-3-5 طرز تهیه استاندارد نیم مک فارلند. 47
2-3-5 طرز تهیه سرم فیزیولوژی 48
3-6 ارزیابی فعالیت ضدمیکروبی عصاره متانولی خارخسک به روش انتشار در آگار (Disc Diffusion) 49
1-3-6 طرز تهیه محیط کشت مولر هینتون آگار. 50
2-3-6 طرز تهیه محلول استوک mg/ml4/ 102 از عصاره متانولی خارخسک 50
3-7 ارزیابی فعالیت ضدمیکروبی عصاره متانولی خارخسک به روش میکروبراث دایلوشن 50
1-3-7 طرز تهیه محیط کشت مولر هینتون براث. 51
2-3-7 طرز تهیه محلول استوک آنتی بیوتیک جنتامایسین 51
3-3-7 طرز تهیه سری رقت از محلول استوک خارخسک mg/ml4/ 102. 52
3-8 ارزیابی فعالیت سینرژیسمی عصاره متانولی خارخسک و جنتامایسین 53
1-3-8 روش انتشار در آگار. 53
2-3-8 روش Checkboard microtiter assay. 54
1-2-3-8 طرز تهیه تترازولیوم کلراید: 56
3-9 آنالیز آماری 56
فصل چهارم. 57
نتایج 57
4-1 آنالیز محتوی ساپونینی خارخسک 58
4-2بررسی اثر ضدباکتریایی عصاره متانولی خارخسک در مقابل ایزولههای بالینی اشریشیاکلی با بهره گرفتن از روش دیسک دیفیوژن 58
4-3 بررسی اثر ضدباکتریایی عصاره متانولی خارخسک در مقابل ایزولههای بالینی اشریشیاکلی با بهره گرفتن از روش میکروبراث دایلوشن 59
4-4 ارزیابی فعالیت سینرژیسمی عصاره متانولی خارخسک و جنتامایسین با روش انتشار در آگار. 60
4-5 ارزیابی فعالیت سینرژیسمی عصاره متانولی خارخسک و جنتامایسین با Checkbord 62
microtiter assay. 62
فصل پنجم. 64
بحث ونتیجه گیری 64
5-1 بحث و نتیجه گیری 65
5-2 پیشنهادات. 71
منابع و مأخذ. 72
الف) منابع فارسی 73
ب) منابع لاتین 76
فهرست جداول
عنوان .صفحه
جدول (3-1) تجهیزات مورد استفاده 42
جدول(3-2) مواد شیمیایی و محیط کشتهای مورد استفاده 43
فهرست نمودار
عنوان.صفحه